C18小柱使用方便、是一种样品处理的固相萃取装置,是常用的药物萃取装置,可再生使用。
一、介绍
此使用手册简单介绍小柱的使用和维护
C18小柱有五种型号供萃取使用,包括:QY3-2001(500mg/3ml)、QY3-2002(500mg/6ml)、、QY3-2003(1000mg/6ml) QY3-2004(2g/12ml)三种柱型。
二、应用
样品处理是分析中最常用的步骤,C18小柱可减少样品处理时间,可做如下使用:
纯化:固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样,当样品流出时,所选择的化合物(包括杂质)被留在萃取柱上。
微量萃取或浓缩:当分析物量在方法限量之下时,可浓缩分析物。
分离:依据样品不同极性进行梯度洗脱、提取样品、增加样品浓度。
溶解交换:如果样品难溶,可用合适的溶剂通过小柱吸附和洗提分析物。
三、C18萃取小柱的使用
下列是小柱使用的五个步骤,每一步不同但并非必须。
步骤1:准备样品——样品既可以是液相也可以是气相,如果是固相,样品上柱前必须溶解或提取。
步骤2:柱的活化或平衡——对于反相柱如C18来说,活化是必须的,先使用强溶剂润湿小柱固定相,再用弱溶剂平衡、活化小柱。
步骤3:上样——将样品装入萃取柱,此时,固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样,当样品流出时,所选择的化合物(包括杂质)被留在萃取柱上。
步骤4:冲洗——用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。
步骤5:洗脱感兴趣的化合物——用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。
四、影响分离的因素
样品分离效果与流速和上载有关,下列是好的建议:
小柱的流速——如果样品流速太快,有效成分可能没留在吸附剂中,所以活化小柱时流速为5~10ml/分钟。
样品上载——小柱的上样量依赖于:样品结构、溶液体积、溶剂极性、吸附剂种类和数量以及样品的吸附性能。
五、小柱的贮存
小柱保存在密封塑料袋中可放置12个月的时间,未使用的小柱如放于打开的塑料袋中,须将袋中的空气排掉,将袋口扎紧两次,用封口带密封,贮存于干燥器中。
六、其它
下列表格可作为不同萃取装置的溶剂强弱选择:
分离模式 | 典型非极性溶剂 | 典型极性溶剂 | 填料粒径 | 是否封端 |
反相 | 水或缓冲液,用有机溶剂如甲醇、乙腈可允许低浓缩。 | 乙腈、甲醇或水/有机混溶剂 | 40-60µm | 封端 |
正相 | 正己烷 | 二氯甲烷、甲醇
| 40-60µm | 封端 |
2019-07
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